非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒（ASFV）引起猪的一种急性、热性、高度接触性动物传染病，临床上以高热、网状内皮系统出血和高死亡率为特征，易感猪群的病死率高达100%。世界动物卫生组织（OIE）将其列为法定报告动物疫病，我国将其列为一类动物疫病。目前，针对非洲猪瘟防控，尚无有效的商品化疫苗，防控重点是做好生物安全管理和早期诊断扑杀净化。

设计方案

国家越来越重视非洲猪瘟对农业与养殖业的影响，所以越来越多人开始建设检疫实验室，进行动物疫病的检测项目。检疫实验室也被称为动物疫病实验室。非洲猪瘟实验室将会越来越重要，那么非洲猪瘟实验室应该如何建设呢？

非洲猪瘟实验室原则上分为四个单独的工作区域：试剂准备区、标本制备区、扩增区、产物分析区。为避免交叉污染，进入各个工作区域必须严格遵循单一方向进行，从试剂准备区→标本制备区→扩增区→产物分析区单向流动。

实验室空调通风系统设计及压力控制是非洲猪瘟实验室的重中之重，虽然非洲猪瘟实验室没有严格的空气洁净度要求，但是为避免各个功能区之间交叉污染的可能性，应采用独立送风、全送全排的气流组织形式，并保证各功能区的压力梯度要求。

试剂准备区

主要进行的操作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。试剂和用于样品制作的材料应直接运送至该区，不得经过其他区域。试剂原材料必须贮存在本区内，并在本区内制备成所需的贮存试剂。

标本制备区

主要进行的操作为样本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定DNA的合成。本区的压力梯度要求为：相对于邻近区域为正压，以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。另外，由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致的污染，所以应避免在本区内不必要的走动。

扩增区

已制备的DNA模板 (来自样本制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。本区的压力梯度要求为：相对于邻近区域为负压，以避免气溶胶从本区漏出。为避免气溶胶所致的污染，应尽量减少在本区内的不必要的走动。个别操作如加样等应在超净台内进行。

产物分析区

主要进行的操作为扩增片段的测定。本区是最主要的扩增产物污染来源，因此对本区的压力梯度的要求为：相对于邻近区域为负压，以避免扩增产物从本区扩散至其它区域。

非洲猪瘟实验室的核心问题是如何避免污染，由于一旦发生污染，实验就必须停止，直到找到污染源为止，而且实验结果必须作废，需重新进行实验。所以发生污染后再围绕实验室来寻找污染源不但耗时而且繁琐，浪费人力物力。非洲猪瘟实验室常见有扩增产物的污染；天然基因组DNA的污染；试剂的污染以及标本间的污染等。因此要避免污染，事前预防是关键。

专业的设计是避免污染的源头，首先应做到各个功能区域科学合理布置；各个功能区域要有明显的标记(如醒目的门牌或不同的地面颜色等)，以避免各个不同实验区域设备物品、试剂等发生混淆。

其次应具备合理的空调通风系统设置，尽量采用独立送风、全送全排的空调系统；严格的压力梯度控制、缓冲、门开启关闭互锁，以确保“不串风”。

用于非洲猪瘟病毒检测的实验室，推荐配置以下设备：II级生物安全柜、混匀仪（涡旋振荡器）、高速离心机、金属浴或恒温水浴锅、组织破碎仪（均质器/匀浆仪）、移液器、冷藏冷冻冰箱、高压灭菌锅。同时，建议实验室配备合适的个人防护用品，如防护服、手套、口罩等。

系统的培训、规范的管理是非洲猪瘟成功运行的重点，可围绕以下内容建立健全培训与管理制度：

1、扩增检验实验室的技术人员必须进行上岗培训，经培训合格后才能从事临床基因扩增检验的工作；

2、操作中使用一次性帽子也是一个有效地防止污染的措施；

3、在实验操作过程中，操作者必须戴手套，并经常更换；

4、清洁工作及时、正确；除常规的消毒液体对表面进行擦拭消毒或紫外线灯的照射消毒外，对一些实验设备还应进行高压消毒处理；

5、严格控制进出实验室的人员；实验工作结束后，必须立即对本区进行清洁；与实验无关的人员不得随意进出实验室，有条件的情况下要设置独立的通道和进出整个实验区的门；尽量减少在实验区内不必要的走动以减少交叉污染的可能性。

6、扩增产物分析区是最主要的扩增产物污染来源，废液不能在实验室中倾倒，必须经消毒液浸泡消毒后在远离实验室的地方弃掉，用过的吸头等一次性材料也应经消毒液浸泡消毒后统一处理，如焚烧等；

7、扩增产物分析区可能会用到某些可致基因突变和有毒物质，应特别注意实验人员的安全防护；

8、完备的实验室配套设施是保证实验工作的必要条件，应根据各个实验室实验内容的不同配备相应的设备和仪器，如生物安全柜、离心机、紫外灭菌灯、超净工作台、加样器等；